Aperçu

Le Western blotting est une technique centrale en biologie cellulaire et moléculaire, qui sert à détecter la présence d’une protéine spécifique dans un mélange complexe extrait de cellules. Comme le montre la figure 1 ci-dessous, la procédure de Western blotting repose sur trois éléments clés pour accomplir cette tâche : la séparation des mélanges de protéines par taille à l’aide d’une électrophorèse sur gel ; le transfert efficace des protéines séparées sur un support solide ; et la détection spécifique d’une protéine cible par des anticorps adaptés. Une fois détectée, la protéine cible sera visualisée sous la forme d’une bande sur une membrane de blotting, un film radiographique ou un système d’imagerie.

Figure 1 : séparation de mélanges de protéines par électrophorèse ; transfert sur une membrane de blotting ; et détection de la protéine cible, qui ne devient visible qu’à l’étape finale sous la forme d’une bande similaire à celle représentée dans le couloir 3. Couloir 1 : Standards de poids moléculaire pré-teints. Couloirs 2 & 3 : mélanges de protéines

Puisque le Western blotting est accompli rapidement, en utilisant un équipement simple et des réactifs peu coûteux, c’est l’une des techniques de laboratoire les plus courantes. Les résultats obtenus sont également faciles à interpréter, uniques et sans ambiguïté. C’est pourquoi il est couramment utilisé seul, ou avec d’autres tests immunologiques, dans la recherche et en milieu clinique.