Visão geral

Western Blotting é uma técnica central em biologia celular e molecular, que é utilizada para detectar a presença de uma proteína específica numa mistura complexa extraída de células. Como realçado pela Figura 1 abaixo, o procedimento Western blotting depende de três elementos-chave para realizar esta tarefa: a separação de misturas proteicas por tamanho utilizando electroforese em gel; a transferência eficiente de proteínas separadas para um suporte sólido; e a detecção específica de uma proteína alvo através de anticorpos adequadamente combinados. Uma vez detectada, a proteína alvo será visualizada como uma banda numa membrana blotting, película de raios X, ou um sistema de imagem.

Figura 1: Separação de misturas de proteínas por electroforese; transferência para uma membrana blotting; e detecção da proteína alvo, que só se torna visível na fase final como uma banda semelhante à mostrada na pista 3. Pista 1: Padrões de peso molecular preservados. Pistas 2 & 3: Misturas de proteínas

Desde que a blotting ocidental é realizada rapidamente, utilizando equipamento simples e reagentes baratos, é uma das técnicas laboratoriais mais comuns. Os resultados alcançados são também fáceis de interpretar, únicos, e inequívocos. Por conseguinte, é rotineiramente utilizada por si só, ou juntamente com outros imunoensaios, na investigação e cenários clínicos.