Resumen
El Western blotting es una técnica fundamental en biología celular y molecular, que se utiliza para detectar la presencia de una proteína específica en una mezcla compleja extraída de las células. Como se destaca en la Figura 1, el procedimiento de Western blotting se basa en tres elementos clave para llevar a cabo esta tarea: la separación de las mezclas de proteínas por tamaño mediante electroforesis en gel; la transferencia eficiente de las proteínas separadas a un soporte sólido; y la detección específica de una proteína diana mediante anticuerpos apropiados. Una vez detectada, la proteína diana se visualizará como una banda en una membrana de blotting, en una película de rayos X o en un sistema de imagen.
Figura 1: Separación de mezclas de proteínas mediante electroforesis; transferencia a una membrana de blotting; y detección de la proteína diana, que sólo se hace visible en la etapa final como una banda similar a la mostrada en el carril 3. Carril 1: Estándares de peso molecular preteñidos. Carriles 2 & 3: Mezclas de proteínas
Dado que el Western blotting se realiza rápidamente, utilizando un equipo sencillo y reactivos baratos, es una de las técnicas de laboratorio más comunes. Los resultados obtenidos son también fáciles de interpretar, únicos e inequívocos. Por lo tanto, se utiliza de forma rutinaria por sí sola, o junto con otros inmunoensayos, en la investigación y en el ámbito clínico.