Antysurowice anty-komórkowe o silnych właściwościach stymulujących wzrost komórek zostały wykazane przez Western blotting, aby mieć dominującą specyficzność wobec białka o masie cząsteczkowej 42K, które zidentyfikowaliśmy jako aktynę. Ekstrakcja komórek L, w oparciu o znaną nierozpuszczalność białek cytoszkieletowych (w tym aktyny) w Triton X-100 i rozpuszczalność aktyny w buforze o niskiej sile jonowej Ca2+ i zawierającym ATP, doprowadziła do uzyskania preparatów wzbogaconych w aktynę, które zachowały immunoreaktywność z antysurowicą przeciwko komórkom L. Antygen 42-kDa wiąże się z deoksyrybonukleazą I, ma pI = 5,2-5,4 i ma skład aminokwasowy, w tym obecność 3-metylohistydyny, zgodny ze składem oznaczonym dla aktyny z innych źródeł. Królicza surowica specyficzna dla tego 42-kDa białka, izolowana metodą SDS-PAGE, odtwarzała stymulację wzrostu komórek przez surowice anty-L-komórkowe, a absorpcja surowicy z oczyszczoną aktyną L-komórkową eliminowała tę stymulację. Ponadto, przeciwciała te wi±ż± się z mikrofilamentami fibroblastów 3T3. Kiedy oczyszczone aktyny były używane jako rozpuszczalne antygenowe inhibitory reaktywności immunologicznej surowicy do białka 42-kDa z nienaruszonymi komórkami L, aktyna grasicy króliczej konkurowała z cząsteczkami powierzchniowymi na komórkach L i zmniejszała efekt stymulacyjny surowicy o 80% przy stężeniu aktyny 150 mikrogramów/ml. Aktyna mięśniowa kurczaka zmniejszała efekt stymulacyjny przeciwciała tylko o 24% przy tym samym stężeniu białka, a aktynę mięśniową myszy była nieefektywna jako inhibitor. Frakcja F(ab')2 anty42K IgG była skuteczna w stymulacji komórek L, dokumentując w ten sposób immunologiczny charakter interakcji aktyna-anty42K. Wnioskujemy, że przeciwciała anty-aktynowe, po związaniu się z determinantami powierzchni komórkowej podobnymi do aktyny na komórkach L, stymulują metabolizm komórkowy.

Dodaj komentarz

Twój adres email nie zostanie opublikowany. Pola, których wypełnienie jest wymagane, są oznaczone symbolem *